ELISA实验组织、细胞样本破碎指南:液氮/超声/冻融方法详解
在ELISA实验中,组织样本的充分破碎和蛋白提取是决定实验成败的关键步骤。今天给大家分享几种主流破碎方法的详细操作条件和注意事项。
液氮研磨法
适用场景:
所有组织类型,尤其是坚韧组织(肌肉、皮肤、肿瘤)
操作条件:
用预冷的PBS(0.01M, pH=7.4)冲洗组织,去除残留血液,称重后将组织剪碎(2-3mm小块,不要过大)。组织块放入研钵,倒入足量液氮浸泡,待液氮未完全挥发时快速用力研磨,直至呈细粉状。一般按1:9的重量体积比加入PBS,比如1g的组织样品对应9mL的PBS;然后用移液器反复吹打混匀,直至完全溶解。
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