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产品属性/ Product Details
| 产品名称 | Biotin Quantitative Determination ELISA Kit | 反应种属 | Universal |
| Uniprot ID | N/A | 别称 | Vitamin H, Coenzyme R, VB7, Vitamin B7, Biopeiderm |
| 检测方法 | Competitive | 灵敏度 | 5.35 pg/mL |
| 标准品 | 500pg/mL | 检测范围 | 7.81-500 pg/mL |
| 样品类型 | Serum, Plasma and Other biological fluids; Sample Volume=50μL | ||
| 检测时间 | 0.75H | 研究领域 | Immunology |
| 测试原理 | 本试剂盒采用竞争ELISA法。用Biotin抗原包被于酶标板上，实验时样品(或标准品)中的Biotin与包被的Biotin竞争辣根过氧化物酶标记的亲和素上的结合位点，游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB)，TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色，加终止液后变成黄色。用酶标仪在450 nm波长处测OD值，Biotin浓度与OD 450值之间呈反比，通过绘制标准曲线计算出样品中Biotin的浓度。 | ||
技术数据/ Technical Data
由于实验操作条件的不同(如操作者、移液技术、洗板技术和稳定条件等)，标准曲线的OD值会有所差异。以下数据和曲线仅供参考，实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
| (pg/mL) | OD |
|---|---|
| 500.00 | 0.173 |
| 250.00 | 0.311 |
| 125.00 | 0.530 |
| 62.50 | 0.861 |
| 31.25 | 1.282 |
| 15.63 | 1.739 |
| 7.82 | 2.048 |
| 0.00 | 2.528 |
精密度
板内精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在1块板子上检测20次。
板间精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在3块板子上检测20次。
| Intra-assay Precision | Inter-assay Precision | |||||
|---|---|---|---|---|---|---|
| Sample | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
| n | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 |
| Mean(pg/mL) | 5.72 | 102.82 | 210.94 | 21.82 | 118.38 | 199.67 |
| Standard deviation | 0.72 | 5.49 | 9.4 | 1.47 | 6.19 | 12.24 |
| C V (%) | 5.14 | 4.71 | 4.16 | 6.36 | 3.75 | 4.27 |
回收率
分别往5个不同样本中添加已知浓度的目标蛋白，做回收实验，得出回收率范围和平均回收率。
| Sample Type | Range(%) | Average Recovery(%) |
|---|---|---|
| Serum (n=8) | 80-96 | 88 |
| EDTA plasma (n=8) | 80-92 | 86 |
| Cell culture media (n=8) | 80-95 | 86 |
线性
分别往5个样本中添加已知浓度的目标蛋白，做回收实验，得出回收率范围及平均回收率。将5个样本分别稀释2倍，4倍，8倍，16倍做回收实验，得出回收率范围及平均回收率。
| Serum (n=5) | EDTA plasma (n=5) | Cell culture media (n=5) | ||
|---|---|---|---|---|
| 1:2 | Range (%) | 82-93 | 95-105 | 93-105 |
| Average (%) | 92 | 101 | 104 | |
| 1:4 | Range (%) | 96-105 | 95-105 | 85-97 |
| Average (%) | 99 | 101 | 88 | |
| 1:8 | Range (%) | 87-98 | 82-95 | 90-99 |
| Average (%) | 91 | 88 | 90 | |
| 1:16 | Range (%) | 85-97 | 81-97 | 82-101 |
| Average (%) | 88 | 96 | 87 |