| 产品名称 | AGEs(Advanced Glycation End Products) ELISA Kit | 反应种属 | |
| Uniprot ID | N/A | 别称 | AGEs; Advanced Glycation End Products |
| 检测方法 | Competitive | 灵敏度 | 75 ng/mL |
| 标准品 | 8000ng/mL | 检测范围 | 125-8000ng/mL |
| 样品类型 | Serum, Plasma, Tissue homogenate and Other biological samples;Sample Volume=50μL | ||
| 检测时间 | 1.5H | 研究领域 | Enzyme & Kinase;Cardiovascular biology; |
| 测试原理 | 本试剂盒采用竞争ELISA法。用AGEs抗原包被于酶标板上,实验时样品或标准品中的AGEs与包被的AGEs竞争生物素标记的抗AGEs单抗上的结合位点,游离的成分被洗去。加入辣根过氧化物酶标记的亲和素,生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB),TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色,加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值,AGEs浓度与OD450值之间呈反比,通过绘制标准曲线计算出样品中AGEs的浓度。 | ||
由于实验操作条件的不同(如操作者、移液技术、洗板技术和稳定条件等),标准曲线的OD值会有所差异。以下数据和曲线仅供参考,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
| (ng/mL) | OD |
|---|---|
| 8000.00 | 0.197 |
| 4000.00 | 0.354 |
| 2000.00 | 0.564 |
| 1000.00 | 0.828 |
| 500.00 | 1.112 |
| 250.00 | 1.412 |
| 125.00 | 1.746 |
| 0.00 | 2.542 |
板内精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在1块板子上检测20次。
板间精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在3块板子上检测20次。
| Intra-assay Precision | Inter-assay Precision | |||||
|---|---|---|---|---|---|---|
| Sample | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
| n | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 |
| Mean(ng/mL) | 275.81 | 1590.01 | 2040.24 | 293.09 | 1733.17 | 2133.11 |
| Standard deviation | 13.79 | 79.5 | 102.01 | 14.65 | 86.66 | 106.66 |
| C V (%) | 2.63 | 3.08 | 6.77 | 2.67 | 3.18 | 7.03 |
分别往5个不同样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围和平均回收率。
| Sample Type | Range(%) | Average Recovery(%) |
|---|---|---|
| Serum (n=8) | 87-93 | 90 |
| EDTA plasma (n=8) | 80-90 | 85 |
| Cell culture media (n=8) | 84-106 | 100 |
分别往5个样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。将5个样本分别稀释2倍,4倍,8倍,16倍做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。
| Serum (n=5) | EDTA plasma (n=5) | Cell culture media (n=5) | ||
|---|---|---|---|---|
| 1:2 | Range (%) | 85-104 | 86-93 | 90-98 |
| Average (%) | 95 | 92 | 92 | |
| 1:4 | Range (%) | 83-96 | 86-93 | 91-99 |
| Average (%) | 84 | 88 | 96 | |
| 1:8 | Range (%) | 96-102 | 93-101 | 83-89 |
| Average (%) | 98 | 94 | 84 | |
| 1:16 | Range (%) | 88-95 | 86-97 | 88-94 |
| Average (%) | 90 | 90 | 89 |