| 产品名称 | Human APLN(Apelin) ELISA Kit | 反应种属 | Human |
| Uniprot ID | Q9ULZ1 | 别称 | APEL, XNPEP2 |
| 检测方法 | 竞争法 | 灵敏度 | 37.5 pg/mL |
| 标准品 | 4000pg/mL | 检测范围 | 62.5-4000pg/mL |
| 样品类型 | Plasma, Serum;Sample Volume=50μL | ||
| 检测时间 | 1.5小时 | 研究领域 | Tumor immunity; |
| 测试原理 | 本试剂盒采用竞争ELISA法。用人APLN抗原包被于酶标板上,实验时样品或标准品中的人APLN与包被的人APLN竞争生物素标记的抗人APLN单抗上的结合位点,游离的成分被洗去。加入辣根过氧化物酶标记的亲和素,生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB),TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色,加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值,人APLN浓度与OD450值之间呈反比,通过绘制标准曲线计算出样品中人APLN的浓度。 | ||
由于实验操作条件的不同(如操作者、移液技术、洗板技术和稳定条件等),标准曲线的OD值会有所差异。以下数据和曲线仅供参考,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
| (pg/mL) | OD |
|---|---|
| 4000.00 | 0.278 |
| 2000.00 | 0.441 |
| 1000.00 | 0.681 |
| 500.00 | 0.998 |
| 250.00 | 1.291 |
| 125.00 | 1.611 |
| 62.50 | 1.881 |
| 0.00 | 2.703 |
板内精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在1块板子上检测20次。
板间精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在3块板子上检测20次。
| Intra-assay Precision | Inter-assay Precision | |||||
|---|---|---|---|---|---|---|
| Sample | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
| n | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 |
| Mean(pg/mL) | 59.92 | 703.950 | 1082.190 | 81.52 | 544.19 | 1125.630 |
| Standard deviation | 7.48 | 42.84 | 60.98 | 3.59 | 42.69 | 70.47 |
| C V (%) | 6.95 | 5.93 | 2.75 | 5.01 | 2.94 | 4.70 |
分别往5个不同样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围和平均回收率。
| Sample Type | Range(%) | Average Recovery(%) |
|---|---|---|
| Serum (n=8) | 83-92 | 85 |
| EDTA plasma (n=8) | 84-108 | 98 |
| Cell culture media (n=8) | 87-96 | 92 |
分别往5个样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。将5个样本分别稀释2倍,4倍,8倍,16倍做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。
| Serum (n=5) | EDTA plasma (n=5) | Cell culture media (n=5) | ||
|---|---|---|---|---|
| 1:2 | Range (%) | 93-101 | 85-94 | 82-93 |
| Average (%) | 97 | 88 | 88 | |
| 1:4 | Range (%) | 86-92 | 85-94 | 95-102 |
| Average (%) | 89 | 88 | 97 | |
| 1:8 | Range (%) | 81-93 | 80-96 | 93-101 |
| Average (%) | 84 | 80 | 97 | |
| 1:16 | Range (%) | 80-95 | 98-105 | 97-105 |
| Average (%) | 85 | 101 | 100 |