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说明书下载产品属性/ Product Details
| 产品名称 | Human Zonulin ELISA Kit | 反应种属 | Human |
| Uniprot ID | P00738 | 别称 | haptoglobin 2 precursor |
| 检测方法 | 双抗体夹心法 | 灵敏度 | 0.47 ng/mL |
| 标准品 | 50ng/mL | 检测范围 | 0.79-50ng/mL |
| 样品类型 | Serum, Plasma, Tissue homogenate and Other biological samples；Sample Volume=100μL | ||
| 检测时间 | 3.5小时 | 研究领域 | Metabolic pathway; |
| 测试原理 | 本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。用抗人Zonulin抗体包被于酶标板上，实验时样品或标准品中的人Zonulin会与包被抗体结合，游离的成分被洗去。依次加入生物素化的抗人Zonulin抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素。抗人Zonulin抗体与结合在包被抗体上的人Zonulin结合、生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物，游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB)，TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色，加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值，人Zonulin浓度与OD450值之间呈正比，通过绘制标准曲线计算出样品中人Zonulin的浓度。 | ||
技术数据/ Technical Data
由于实验操作条件的不同(如操作者、移液技术、洗板技术和稳定条件等)，标准曲线的OD值会有所差异。以下数据和曲线仅供参考，实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
| (ng/mL) | OD | Corrected |
|---|---|---|
| 50.00 | 2.472 | 2.435 |
| 25.00 | 1.616 | 1.579 |
| 12.50 | 0.950 | 0.913 |
| 6.25 | 0.431 | 0.394 |
| 3.13 | 0.222 | 0.185 |
| 1.57 | 0.124 | 0.087 |
| 0.79 | 0.072 | 0.035 |
| 0.00 | 0.037 | 0.000 |
精密度
板内精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在1块板子上检测20次。
板间精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在3块板子上检测20次。
| Intra-assay Precision | Inter-assay Precision | |||||
|---|---|---|---|---|---|---|
| Sample | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
| n | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 |
| Mean(ng/mL) | 1.45 | 8.53 | 15.91 | 1.55 | 8.09 | 14.89 |
| Standard deviation | 0.08 | 0.54 | 1.16 | 0.07 | 0.33 | 1.08 |
| C V (%) | 4.61 | 2.87 | 3.69 | 6.67 | 4.43 | 6.93 |
回收率
分别往5个不同样本中添加已知浓度的目标蛋白，做回收实验，得出回收率范围和平均回收率。
| Sample Type | Range(%) | Average Recovery(%) |
|---|---|---|
| Serum (n=8) | 80-95 | 87 |
| EDTA plasma (n=8) | 86-99 | 92 |
| Cell culture media (n=8) | 82-95 | 88 |
线性
分别往5个样本中添加已知浓度的目标蛋白，做回收实验，得出回收率范围及平均回收率。将5个样本分别稀释2倍，4倍，8倍，16倍做回收实验，得出回收率范围及平均回收率。
| Serum (n=5) | EDTA plasma (n=5) | Cell culture media (n=5) | ||
|---|---|---|---|---|
| 1:2 | Range (%) | 87-103 | 91-99 | 93-102 |
| Average (%) | 92 | 99 | 101 | |
| 1:4 | Range (%) | 97-105 | 83-89 | 81-96 |
| Average (%) | 102 | 85 | 82 | |
| 1:8 | Range (%) | 80-90 | 88-104 | 93-106 |
| Average (%) | 84 | 95 | 102 | |
| 1:16 | Range (%) | 87-96 | 97-103 | 82-95 |
| Average (%) | 91 | 102 | 92 |
检测流程/ Assay Procedures
